PCR實驗室設計與建設要求

PCR試驗是指基因擴增試驗,其特點是可以大幅增加微量DNA。它是一種常規的生物學研究和實驗方法,廣泛應用于各個生物領域,如艾滋病檢測、乙肝、禽疫、癌基因檢測和診斷、DNA指紋、個體識別、親子鑒定和法醫物證等。中創智領實驗室現在正在進行PCR、詳細說明施工要求和要點。

 

一.PCR實驗室布局

 

原則上,PCR實驗室是四個獨立的工作區域:試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產品分析區,并有專用過道。每個工作區域應設置緩沖間,工作區和緩沖間應安裝連鎖裝置。不同功能的工作區域應分開,每個工作區域都有明顯的標志,不能直接到達。如果間隙連接,應安裝物體傳輸窗口。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,即從:試劑準備區-樣品制備區-PCR擴增室-產品分析室,不得反向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增增增增后區。㎡一個40W紫外線燈。


二是實驗室各區功能及關鍵設備

 

1. 試劑準備區:主要制備試劑、分裝和主反應混合液。樣品制作的試劑盒材料應直接運輸到該區域。試劑原料必須儲存在該區域,并在該區域制備所需的試劑。該區域的關鍵設備包括天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。對于氣流壓力控制,這個區域沒有嚴格的要求,一般是 10Pa。

 

2. 樣品制備區:主要用于樣品的儲存、核酸提取、儲存和添加到擴增反應管和測量DNA的合成。該區域的關鍵設備包括冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器等。該區域的壓力梯度要求是:與相鄰區域相比,為了防止氣溶膠污染從相鄰區域進入該區域,一般為 10Pa。

 

3. 擴增區:主要進行DNA擴增。此外,該區域還可以添加已制備的DNA模板(來自樣品制備區),并在主反應混合液(來自試劑準備區)中制備反應混合液。該區域的關鍵設備包括擴增器、冰箱、離心機、加樣器等。該區域的壓力梯度要求是:相對于相鄰區域的負壓,一般為-25Pa,防止氣溶從該區域漏出。

 

4. 擴增產品分析區:擴增產品的測量。該區域的關鍵設備包括酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱。該區域的壓力梯度要求是:與相鄰區域相比,一般為-25Pa,防止擴增產品從該區域擴散到其他區域。

 

三. 排氣系統和壓力控制

 

每個區域之間應具有單個實驗流程、物流、人流和氣流,形成單向流程的保護屏障,防止實驗室之間的相互影響,避免氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。

 

PCR實驗室對凈化沒有嚴格的要求,但為了防止每個實驗區交叉感染的概率,應采用全送全排氣流組織的方法,嚴格控制送貨比例,以保證一個實驗區的壓力要求。

 

四.PCR實驗室裝修

 

實驗室的圍護結構應牢固,密封性能好;所有陰陽角應過??;墻體內壁光滑,無灰塵,耐腐蝕,易清洗消毒;路面采用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫、無滲漏、光滑、耐腐蝕的要求。

 

五.PCR實驗室注意事項

 

1.幾個區域的尺寸設置,試劑準備區、擴增區、擴增產品分析區,空間可以相對較小。生物安全柜和低溫冰箱應放置在樣品制備區,空間應更大。

試劑準備區,樣品制備區設置緊急洗眼器,確保操作人員的安全。

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